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NORMAS LEGALES El Peruano Lima, sábado 14 de julio de 2007 349043 NOMBRE: CALDO DE CEREBRO - CORAZÓN (Brain Heart Broth) Descripción y Uso:Para el cultivo de diversos microorganismos patógenos exigentes. Estos medios de cultivo corresponden a las recomendaciones de los Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (1992) Forma de actuación:Estos medios de cultivo se basan en el principio del Caldo Rosenow preparado con trozos de cerebro ( Rosenow 1919) y son adec uados con trozos el cultivo de muchas bacterias exigentes, como Estreptococos, Pneumococos, Meningococos y otros. Para el cultivo Gonococ os hay que añadir líquido ascítico. El Caldo de cerebro-corazón es especialmente adecuado para el cultivo de Esta fi lococos destinados al ensayo de plasma coagulasa y para la realización de hemocultivos. El crecimiento de gérmenes anaerobios o microaeró fi los resulta decisivamente mejorado por la adición al Caldo de pequeñas cantidades de Agar-agar (aprox. 0,05 - 0,2 % ).Sobre la base del Agar-cerebro-corazón, Queiroz y col. (1987) desarrollaron un agar selectivo para Campylobacter pylori, denomi nándolo Medio Belo Horizonte (MBH). El Agar-cerebro-corazón, aparte de su aplicación en el terreno bacteriológico, es adecuado también para el cultivo de hongos pa tógenos El crecimiento de la fl ora bacteriana de acompañamiento puede inhibirse notablemente por adición de 20 UI de Penicilina y 40 ug de Estreptomicina por mL de cultivo. Se recomienda la adición de Cicloheximida (0,05 ug/ml) y de Cloranfenicol (0,5 ug/mL) para el aislamiento se lectivo de hongos exigentes, especialmente de Histoplasma capsulatum y Blastomyces, a partir de materiales policontaminados objeto de investigación. Este medio de cultivo es menos adecuado para el estudio de las formas hemolíticas (tras adición de sangre), debido a su conteni do de glucosa. Substrato alimenticio 27,5 Disolver 52 g/litro (Agar - cerebro- corazón) o bien 37 g/L (Caldo de cerebro-corazón) y esterilizar en autoclave (15 min. a 121ºC).pH: 7,4 + 0,2Ambos medios de cultivo son ligeramente parduscos. El caldo tiene un aspecto claro, mientras que el agar puede presentar, a veces, opalescencia. Composición: (extracto de cerebro, extracto de corazón y peptona)(g/L) Preparación: D(+)-glucosa 2,0 Cloruro sódico 5,0Hidrógenofosfato disódico 2,5Agar 15,0 52,0 Empleo e Interpretación:De acuerdo con la correspondiente descripción y uso. NOMBRE:EMULSION YEMA DE HUEVO TELURITO (Egg-yolk Tellurite Emulsión) Descripción y Uso:La emulsión yema de huevo-telurito, se emplea como aditivo en el Agar Baird Parker (base), y posibilita la demostración de la actividad lecitinasa y la reducción del telurito. Composición: (g/L)Yema de huevo estéril 500,00 Preparación:Agitar el frasco con fuerza para resuspender el posible sedimento formado. 50 mL de la emulsión de yema se mezclan con 950 mL del medio de cultivo esterilizado y enfriado a 45-50 ºC. Verter en placas.Cloruro de sodio 4,25 Telurito potásico 2,10Agua destilada hasta 1000 ml Al tomar la emulsión del frasco, cuidar de que se efectúe de forma estéril. Al contrario que las placas para cuya preparación se añaden por separado la emulsión y el telurito potásico, aquellas placas que se preparan con emulsión yema de huevo-telurito son estables aproximadamente 2 meses almacenadas a 4°C NOMBRE: AGAR-PEPTONA DE CASEÍNA-PEPTONA DE HARINA DE SOJA (TSA) Composición: (g/L)Peptona de caseína 15,0 Preparación:Diluir 40 gramos del medio de cultivo en 1000 mL de agua destilada, dejar reposar por 15 minutos, calentar en baño maría hasta disolver por completo. Distribuir en tubitos de 13 x 100 mm a razón de 3 mL, llevar a esterilizar en autoclave a 121ºC, de 15 libras de presión, durante 15 minutos, dejar enfriar. Los tubos destinados al cepario no necesitan inclinación.Peptona de harina de soya 5,0 Cloruro de sodio 5,0Agar 15,0 40,0 pH: 7.3 + 0,2 NOMBRE: ROJO VIOLETA BILIS AGAR (VRBA) Descripción y Uso:Agar selectivo para la demostración y numeración de bacterias coliformes, inclusive E.coli, según DAVIS (1951), en agua, leche, helados, carnes y otros alimentos. Forma de actuaciónEl violeta cristal y la sales biliares inhiben el crecimiento sobre todo, de la fl ora gram-positiva acompañante. La degradación de la lactosa a ácido se pone de mani fi esto por el viraje a rojo del indicador de pH Rojo neutro y por una precipitación de ácidos biliares. Composición: (g/L)Extracto de levadura 3,0 Preparación:Disolver 39.5 g/litro y esterilizar con cuidado (30 minutos a vapor fl uente). ¡No esterilizar en autoclave! El medio de cultivo preparado es claro y rojizo pardusco.Peptona 7,0 Sales biliares 1,5Lactosa 10,0Cloruro de sodio 5,0 Rojo neutro 0,03 Cristal violeta 0,002Agar 15,0 41,532 pH: 7.4 + 0,1