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Pág. 215580 NORMAS LEGALES Lima, domingo 13 de enero de 2002 - A 25 mL de agua de mar agregar 2,5 mL de la mezcla de reactivos y agitar. - Después de 30 minutos y dentro de 2 horas, se mide la extinción de la muestra a 885 nm empleando un espec-trofotómetro y usando una celda de 1 cm de paso para muestras concentradas y celda de 5 cm para muestras diluídas. - Hacer un blanco de reactivos con agua destilada para corregir la extinción medida por substracción. Tabla A.4. Volumen de solución necesario para preparar la mezcla de reactivos. REACTIVOS VOLUMEN (mL) Molibdato de amonio 12,50 Acido sulfúrico 31,25 Acido ascórbico 12,50 Tartrato antimonil potásico 6,25 c) Cálculos La concentración de fosfatos se calcula con la siguiente fórmula: P (µmol.L-1) = Ac x F Donde: P = Concentración de fosfatos (µmol PO4.L-1) Ac = Absorbancia corregida F = Factor de calibración del equipo (curva de ca- libración). P (mg PO4.L-1) = P ((µmol.PO4.L-1) * (0,031) H. DETERMINACION DE MACROBENTOS DE FONDO BLANDO METODOMediante identificación de especies, conteo de individuos y pesado húmedo. REFERENCIAS CARBAJ AL, W. 1998. Detección de los efectos ambien- tales sobre las comunidades marinas. Manual curso deentrenamiento. Instituto del Mar del Perú. CARRASCO, D. F . y V. GALLARDO. 1989. La contamina- ción marina y el valor de la macroinfauna bentónica en su evaluación y vigilancia: casos de estudio en el litoral de Concepción, Chile. Biología Pesquera, 18: 15-27. PEARSON, T .H. and R. ROSENBERG. 1978. Macroben- thic succession in relation to organic enrichment and po-llution of the marine environment. Oceanography and Marine Biology, An. Annual Review, 16: 229 – 311. COLECTA Y PRESERVACION - La muestra es colectada mediante una Draga tipo Van Veen de 0,05 m 2 de área de mordida, la cual es lanza- da desde la embarcación. En cada estación de mues- treo se debe tomar la muestra por triplicado. - Tras la recolección de la muestra del fondo, se vier- te todo el contenido de la draga a las bolsas tamiz de 500 mm de tamaño de poro y se lava con agua de mar cuidadosamente eliminando todo el fango. - Luego el material retenido es trasladado con cuida- do a los frascos muestreo de plástico de 0,5 L pre- viamente rotulados. Enseguida las muestras debenser fijadas con una solución de formalina al 10 % tamponada con bórax. Los frascos deben ser llena- dos con la solución de formalina hasta casi el topedel frasco. No hay tiempo de caducidad de la mues- tra. - Los frascos de muestreo deben ser etiquetados o ro- tulados anotando lo siguiente: Número de estación y número de réplica, lugar de muestreo, fecha, volumen de muestra (porcentaje de llenura de la draga), respon-sable de la colecta.EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS Equipos - Microscopio estereoscopio y microscopio compuesto - Balanza Analítica: rango de medida 0,0001 – 200 g. Materiales - Draga Van Veen con 0,05 m 2 de área de mordida - Frascos de plástico (boca ancha) con 0,5 L de capa- cidad - Bolsas tamizadores con 500 mm de tamaño de poro - Juego de T amices de 300 – 500 µm de tamaño de poro - Pinzas de punta fina- Espátulas - Papel Canson - Bandejas de plástico Reactivos - Formalina comercial (40%) - Bórax- Azul de Metileno - Rosa de Bengala - Alcohol (96°) PROCEDIMIENTO ANALITICO a) Análisis de la muestra- Verter el contenido de los frascos en tamices de 300 µm y lavar las muestras varias veces con agua corrien-te para eliminar toda la formalina. - Examinar las muestras con un microscopio estereos- copio y separar los organismos por categorías taxo-nómicas (p.e. moluscos, crustáceos, poliquetos, equi- nodermos, otros). Para facilitar la separación de los poliquetos se pueden teñir adicionando rosa de ben-gala (200 mg.L -1) en el preservante de formol durante 24 horas como mínimo. Para facilitar la identificación de los moluscos se puede emplear el azul de metile-no. - Identificar los organismos con ayuda del microsco- pio estereoscopio o un microscopio compuesto se-gún sea el caso hasta el mínimo nivel taxonómico posible. - Posteriormente se procede a contar y pesar (peso hú- medo) la cantidad de individuos por especie presen- tes por cada réplica. Para el recuento de los indivi- duos sólo considerar aquellos especímenes que po-sean región cefálica. b) Cálculos: Con los datos de densidad, biomasa y número de espe- cies, se procede a la determinación cuantitativa de los siguientes parámetros comunitarios: - Riqueza específica: d = (S – 1) / log N do nde: S: número de especies N: número de individuos. - Densidad o abundancia relativa (N° ind/0,05m2) A = Σ ni/ N donde: ni: abundancia de la especie i N: número total de individuos - Biomasa relativa (g/0,05 m2) B = Σ wi / W donde: wi: peso en g. de la especie i W: peso total de los individuos - Diversidad especifica de Shannon y Wiener (bits/ind.): H’ = - S (Pi log2 Pi) donde: Pi: = ni/ N - Equidad de Pielou: J’ = H’ / Hmaxdonde: Hmax = log2 S S : número de especiesH’: Indice de diversidad. c) Criterios para interpretación de los resultados