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11 NORMAS LEGALES Jueves 12 de diciembre de 2024 El Peruano / bovina realizada treinta (30) días antes del inicio del periodo de la colecta del semen. 13. Campilobacteriosis genital bovina (Campylobacter fetus venerealis): a. El centro de inseminación artifi cial está libre de campilobacteriosis genital bovina; y los animales son sometidos al descarte de la enfermedad mediante cultivos de semen y/o de muestras prepuciales, con resultados negativos; Y b. Los toros donadores: i. No fueron utilizados nunca para la monta natural, o ii. Montaron únicamente novillas vírgenes. 14. Tricomoniasis: Los toros donadores han permanecido en un centro de inseminación artifi cial donde no fue declarado ningún caso de Tricomoniasis y resultaron negativos al examen microscópico directo, y al cultivo de muestras prepuciales; Y a. No fueron utilizados nunca para la monta natural, o b. Montaron únicamente novillas vírgenes. 15. Leucosis bovina enzootica: a. Antes de su ingreso al centro de inseminación artifi cial el toro donante fue sometido a una cuarentena de 30 días, dando resultados negativos a: - Inmunodifusión en Gel de Agar; o - ELISA indirecta; o - ELISA de bloqueo o competitiva; o - Si el toro donante tiene menos de dos (2) años de edad, su madre uterina debió ser serológicamente negativa a Inmunodifusión en Gel Agar; o ELISA indirecta; o ELISA de bloqueo o competitiva. Y b. Durante la permanencia del toro donante en el centro de inseminación artifi cial, a partir de muestras sanguíneas, han resultado negativas a: - Dos (2) pruebas de Inmunodifusión en Gel de Agar, la primera realizada en no menos de treinta (30) días antes de la colecta se semen y la segunda no menos de noventa (90) días después de la colecta; o - Dos (2) pruebas de ELISA indirecta, la primera realizada en no menos de treinta (30) días antes de la colecta de semen y la segunda no menos de noventa (90) días después de la colecta; o - Dos (2) pruebas de ELISA de bloqueo o competitiva, la primera realizada en no menos de treinta (30) días antes de la colecta de semen y la segunda no menos de noventa (90) días después de la colecta; o - Si el toro donante tiene menos de dos (2) años de edad, su madre uterina debió ser serológicamente negativa a Inmunodifusión en Gel Agar; o ELISA indirecta; o ELISA de bloqueo o competitiva. Y c. Los toros donantes han permanecido en un centro de inseminación artifi cial en el que todos los animales estén libres de leucosis bovina en el momento de la toma del semen. 16. Rinotraqueitis infecciosa bovina: a. Los toros donadores que no proceden de un establecimiento libre de la rinotraqueítis infecciosa bovina han sido sometidos a una prueba serológica (para la detección de anticuerpos contra el virus completo) mediante ELISA, con resultados negativos durante los treinta (30) días antes de ingresar en una estación de cuarentena del centro de inseminación artifi cial; yb. Los toros donadores, en la estación de cuarentena del centro de inseminación artifi cial, han permanecido aislados durante un periodo de treinta (30) días y han sido sometidos a dos (2) pruebas serológicas (para la detección de anticuerpos contra el virus completo) mediante ELISA, con resultados negativos, con un intervalo mínimo de veintiún (21) días a partir de muestras sanguíneas; y c. Todos los toros donadores en el centro de inseminación artifi cial se someten al menos una vez al año a una de las siguientes pruebas con resultado negativo: - Prueba de Neutralización Viral con un período de incubación de la mezcla de suero-virus por veinticuatro (24) horas; o - Prueba de ELISA de bloqueo; o - ELISA indirecta. 17. Diarrea viral bovina:Antes de ingresar en una estación de cuarentena del centro de inseminación artifi cial, y durante la cuarentena, el toro donante fue sometido a la prueba de ELISA para determinar la presencia o ausencia de anticuerpos y, al mismo tiempo, han sido sometidos a prueba virológica con resultado negativo: - Prueba de Aislamiento Viral a partir de sangre; o - ELISA (detección de antígenos virales); o- Prueba de PCR en sangre. Y a. Para todos los toros donadores serológicamente positivos, se probó virológicamente (prueba de aislamiento del virus, prueba ELISA o PCR) una muestra de semen recogido (fresco) previamente al envío inicial del semen; Y/O b. Los toros donadores seronegativos en el Centro de Inseminación Artifi cial y todos los toros ingresados en el Centro antes de los seis (6) meses de edad se someten a una prueba serológica por ELISA al menos una vez al año. 18. Lengua azul: Los toros donantes dieron resultado negativo a una de las siguientes pruebas: a. Una (1) prueba serológica de ELISA Competitiva, o b. Una (1) prueba de Inmunodifusión en Agar Gel. Realizadas entre los veintiocho (28) y sesenta (60) días después de cada colecta de semen para la exportación. O Dieron resultados negativos a pruebas de identifi cación de agente a partir de muestras de sangre: a. Pruebas de aislamiento de virus, tomadas al principio, al fi nal y por lo menos cada siete (7) días durante el periodo de colecta de semen; o b. Pruebas de PCR, tomadas al principio, fi nal y cada veintiocho (28) días durante el periodo de colecta de semen. 19. Virus de Schmallemberg: a. El semen de este envío fue colectado antes del 31 de mayo 2011; o, b. Los toros donantes resultaron negativos a una prueba serológica (ELISA, inmunofl uorescencia o prueba de seroneutralización) para detectar anticuerpos contra la enfermedad de Schmallenberg, por lo menos 28 días después de la última colecta de semen para este embarque (indicar la fecha de la prueba y el laboratorio); o, c. Cada lote de semen para este embarque recibió una prueba para verifi car la presencia del genoma del virus de Schmallenberg por un método de extracción ARN validado y por un sistema RT-qPCR, obteniendo resultados negativos.